大家好，小堂為大家解答以上問題。革蘭氏染色的注意事項，革蘭氏染色的注意事項目前這個還是有很多人還不知道，現(xiàn)在讓我們一起來看看吧！

解答：

1、需要注意的事項

2、1.使用活性生長菌株染色時，老化的革蘭氏陽性菌會被染成紅色，造成假陰性。

3、2.涂片不宜過厚，以免脫色不完全造成假陽性。

4、3.脫色是革蘭氏染色成功的關鍵。脫色不足導致假陽性，過度脫色導致假陰性。

5、實驗過程

6、1.取玻片用紗布擦干，用Mark在玻片一側畫一個小圓圈(用于大致確定菌滴的位置)。在火焰上烘烤涂有細菌的部分，以去除油脂。

7、2.涂抹。

8、液體培養(yǎng)基：左手持菌液試管，在酒精燈火焰附近約5 cm處打開試管蓋；右手拿著接種環(huán)，在火焰中燃燒消毒。冷卻后，從試管中取出一圈菌液，在干凈無脂的載玻片上涂上直徑約2 mm的薄膜，最后將接種環(huán)在火焰中燃燒消毒。

9、固體培養(yǎng)基：首先在載玻片上滴一滴無菌水，然后取少量帶接種環(huán)的細菌，涂在載玻片上，使其變薄均勻。

10、3.風干：讓涂抹物在空氣中自然風干。

11、4.固定：讓膜面朝上，用火焰固定2-3次(最好不要燙傷手)。

12、5.染色：將固定好的涂片放在報紙上，滴草酸銨結晶紫溶液，染色1分鐘。

13、6.水洗：用水慢慢沖洗涂片上的染色液，用吸水紙吸干。簡單染色后可觀察細胞形態(tài)。

14、7.媒染：滴1滴碘溶液，染1分鐘，水洗。

15、8.脫色：吸收殘留水分，連續(xù)滴加95%乙醇脫色20-30秒，直至出水呈紫色，立即用水沖洗。

16、9.復染：滴加范宏復染3-5分鐘，水洗。此時，革蘭氏染色結束。

本文到此結束，希望對大家有所幫助。